试管婴儿过程中,最重要的一项就是胚胎培养,在胚胎评估的第三天属于分裂期,到了5-6天的胚胎,就会发展成上百个囊胚,这个时候就会进行评级划分,也是反应胚胎发育的综合指标,那么囊胚等级应该怎么看?
囊胚评分是根据囊胚期胚胎扩张程度、内细胞团和滋养层的发育水平进行评估。在临床上面是由胚胎扩张程度和孵化状态、内细胞团评分、滋养层细胞评分3个部分进行分级。
胚胎扩张程度和孵化状态:1期:早期有腔室囊胚,囊胚腔小于胚胎总体积的1/2;2期:囊胚腔体积大于或等于胚胎总体积的1/2;3期:完全扩张囊胚,囊胚腔完全占据了胚胎的总体积;4期:扩张囊胚,囊胚腔完全充满胚胎,胚胎总体积变大,透明带变薄;5期:正在孵出的囊胚,囊胚的一部分从透明带中逸出;6期:孵出的囊胚,囊胚全部从透明带中逸出。 进入扩张期后的囊胚,再按照内细胞团和滋养层的质量分为A、B、C三级。 内细胞团评分:A为包裹紧密、细胞多;B为结构松散,少量细胞;C为极少量细胞。 滋养层细胞评分:A为许多细胞形成紧密结合的上皮;B为少量细胞形成结构松散的上皮;C为极少量细胞。 按照这种评分可以得到像4AB、4AA这样的评级。比如”4AB“中,”4“表示囊胚处于4期,A表示囊胚的内细胞团评级,B表示囊胚的滋养层细胞评级。其中A级优于B级,B级优于C级。
一般来说,胚胎的移植或是冷冻要么发生在第三天要么发生在第五天。卵子刚取出来,只是单细胞,受精12-24小时后在培养液里发育并分裂,所以到第三天一般是4-8细胞的胚胎(Embryo)。而到第五天,大约发展成上百个细胞,此时胚胎也被称被囊胚(Blastocyst)。界于两者之间(一般是第四天),还有一个阶段叫桑葚胚(morula),因桑葚胚比较难评级,一般不做评级。
第三天(D3)胚胎的评级
一般来说,胚胎评级跟以下几个因素有关,胚胎的细胞数,分裂后细胞的均匀程度,以及碎片程度。这里先说一个比较常见的分级法,是从一级到四级,一级最好,四级最差:
通常,胚胎师会在第1天、第3天和第5天发布阶段养囊结果。通过阅读这三份报告,就可以了解你的胚胎在这段时间内培养到什么程度,正在经历什么神奇的变化。
医生在B超下进行卵巢穿刺,并将取出的卵泡液放入预热的培养皿中,再在显微镜下准确、快速地将吸入的卵子转移到培养液中,等待受精。受精6小时后,将通过去除颗粒细胞来判断受精情况。
卵子在此过程中的等级评估如下:
lMII期:成熟的卵子,理想的受精卵;
lMI期:不成熟的卵子,可尝试受精;
lGV期:不成熟的卵子,无受精能力。
一般成熟卵子占取卵总数的80%,因此,第1天的养囊报告将被告知:取卵的数量,其中成熟卵子有多少,非成熟卵子有多少,单精子胞浆内注射的卵子有多少、成功受精的数量有多少等。
Tips:
受精后16-18小时内,胚胎师会在受精卵中看到一个或多个圆圈,即原核(PN))。
l2PN:两个原核(卵子细胞核+精子细胞核),说明卵子受精正常。
正常受精卵
l0PN:发育过快或过慢,错过观测窗口未观测或受精失败,需要继续跟踪观测。
l1PN:一个原核(只有卵子或精子的细胞核),说明受精异常。
l大于等于3PN:多个精子或分裂形成多原核,说明受精异常。
异常受精卵
上图分别显示了0PN的卵细胞、1PN的受精卵和3PN的受精卵。
胚胎发育的第三天,胚胎发育到卵裂期,约8个细胞左右,这阶段会记录卵裂球的大小是否均匀、碎片比例、对称度等信息。
胚胎发育的不同阶段
此时,合子分裂6次以上,已经形成囊胚期。细胞间开始形成囊腔,根据囊腔扩张程度(1-6期),内细胞数量紧密度(A、B、C级)和滋养外胚层细胞质量(A、B、C级)进行评级。
囊胚示意图
例如:当胚胎在第五天是4AA级或4AB级囊胚时,你应该明白这是囊胚腔扩张期,内细胞团和滋养外胚层都是优质的。一般来说,医生选择移植的胚胎都是优质的,我们不必太担心。
从这一天起,胚胎达到囊胚阶段,如果你想做第三代试管婴儿PGS,会取外层滋养几个细胞进行PGS检测。未达到囊胚阶段的胚胎将持续培养,最多不超过7天。
通过看养囊报告,我们可以看到新生命的萌芽过程。随着生殖技术的发展,不孕不育家庭的生育梦想将越来越容易实现。
评价卵裂期胚胎的指标主要包括细胞数、胚胎碎片程度以及胚胎对称性。主要根据这3个指标来给胚胎评级,分为I、II、III、IV级,其中I级胚胎是根据形态学评级最好的胚胎。
细胞数:是指胚胎中含有几个细胞。一般来说,第三天早上观察到有8个细胞是最佳的。细胞数不足8个时,胚胎发育能力随着细胞数的减少而降低;。而细胞数超过8个时判断胚胎质量比较困难,需要胚胎学家来具体分析。胚胎碎片程度:是指从胚胎上脱落下来的无核的胞浆碎片,碎片程度越高就预示着胚胎发育能力越差。胚胎对称性:是对胚胎中不同细胞大小的评估,细胞大小对称的胚胎发育潜能要优于不对称的胚胎。除了以上这三个主要的评价指标,胚胎细胞中是否存在多核(即≧2个细胞核)、细胞胞浆是否存在空泡等内容物、透明带的形态等都是辅助判断胚胎质量的指标。
一个质量优的Ⅰ级胚胎,胚胎含有8个细胞,未见明显碎片,细胞大小对称,胞浆均质、无空泡等内容物;
一个质量良的Ⅱ级胚胎,胚胎有8个细胞,存在约10%碎片,细胞大小不对称。
Ⅲ级胚胎,胚胎含有4-5个细胞,存在近50%碎片,细胞大小不对称;右侧为一个质差的Ⅳ级胚胎,呈碎片化,未见明显细胞。一般认为Ⅲ级和Ⅳ级胚胎,无移植和冷冻的价值。
卵裂期胚胎评分是在“以貌取胚”,不过形态上评分稍低的胚胎,其发育潜能也未必不如评分高的胚胎。胚胎的“外貌”固然重要,但内在“美”也很关键。比如胚胎染色体是否异常。同样是8细胞I级的胚胎,年轻女性胚胎染色体异常率较低,而高龄女性胚胎染色体异常率就相对较高。取卵后第3天看起来还算“俊俏”的卵裂期胚胎,其实有一些没有继续往后发育到囊胚的能力。所以囊胚培养是一个筛选优质胚胎的好方法,能发育到囊胚的胚胎都更“优秀”。不同囊胚的质量也有差异,所以需要对囊胚形态进行评分,从而“优中选优”。
如果是正在孵出的囊胚,那么囊胚的一部分会处于正在从透明带破裂口孵出的状态。而如果是孵出的囊胚,那囊胚就会全部从透明带中逸出了。在这里需要提醒大家一点,并不是说等级高的囊胚,就一定会比等级低的囊胚健康。
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